Ветеран Вьетнама Линкольн Клей возвращается к жизни в Нью-Бордо 1968 года, но потеря его приёмной семьи от рук итальянской мафии приводит к мести. Он собирает новых союзников и строит собственную преступную организацию, решая, кому из подручных доверять и кого вознаграждать. Город вдохновлён Новым Орлеаном и передаёт обстановку своей эпохи.

Mafia III: Definitive Edition объединяет основную игру с сюжетными дополнениями Faster, Baby!, Stones Unturned и Sign of the Times, а также наборами Family Kick-Back Pack и Judge, Jury & Executioner. Это издание 2020 года сохраняет основу третьей части: рукопашные схватки, перестрелки, автомобильные поездки и погони от третьего лица.

Для выполнения задач можно выбирать скрытный подход либо открытое столкновение. Ослабление влияния противников и отношения с союзниками сопровождаются решениями, влияющими на историю. Предусмотрены разные окончания и дополнительная сцена после титров.